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臨床級(jí)凍存液

更新時(shí)間:2023-10-24

訪問量:1824

廠商性質(zhì):代理商

生產(chǎn)地址:

簡(jiǎn)要描述:
臨床級(jí)凍存液用剝離溶液收集要冷凍保存的細(xì)胞,并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)。
貨號(hào)MS-4601W SMS-4702WS規(guī)格1箱
供貨周期一個(gè)月主要用途再生醫(yī)學(xué)、干細(xì)胞庫(kù)、日本細(xì)胞培養(yǎng)中心CPC(Cell Processing Ce
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合
  CP-1細(xì)胞凍存液(臨床級(jí)凍存液)
 
  ?獲得日本再生醫(yī)學(xué)等產(chǎn)品材料的資格認(rèn)證
 
  1.產(chǎn)品從1992年開始推廣應(yīng)用
 
  2.在日本國(guó)內(nèi)的GMP設(shè)備中生產(chǎn)制造
 
  3.進(jìn)行了非臨床實(shí)驗(yàn)
 
  5.可以在-80℃的冰箱中冷凍保存
 
  6.不含動(dòng)物來(lái)源的成份
 
  7.成分公開透明
 
  8.擁有日本原料藥注冊(cè)證(MF)

  應(yīng)用實(shí)例
 

  I 懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞的冷凍方法
 

 

  II 使用CP-1HG冷凍保存/解凍造血干細(xì)胞的方法
 

 

  III。 使用CP-1HG間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存/解凍方法
               冷凍保存液的制備
                 ·1.CP-1高等級(jí),25%HSA,將介質(zhì)冷卻至4℃。
                 ·2.將CP-1高級(jí)6.8 mL,25%HSA 3.2 mL和10.0 mL培養(yǎng)基加入離心管中,并均勻混合。
                 ·3.即將使用之前,請(qǐng)保存在4℃下。
                細(xì)胞冷凍保存
                 ·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細(xì)胞,并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)。
                 ·2.離心除去上清液。
                 ·3.預(yù)先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25%HSA /培養(yǎng)基(冷凍保存液-2的制備),均勻懸浮至1×106細(xì)胞/ mL。
                 ·4.將各1 mL放入冷凍管中,放入冷凍容器中,并在-80°C緩慢冷凍。
                 ·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。
                 解凍細(xì)胞
                 ·1.事先在離心管中準(zhǔn)備9 mL培養(yǎng)基。
                 ·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管,并在37°C的溫水浴中快速融化。
                 ·3.將所有解凍的細(xì)胞添加到培養(yǎng)基中并離心。
                 ·4.除去上清液,并添加適量的培養(yǎng)基。
                 ·5.在每種使用的細(xì)胞類型的最佳條件下進(jìn)行培養(yǎng)。 
 
  IV 評(píng)價(jià)結(jié)果(間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存)
 
  V 使用CP-1HG冷凍保存iPS / ES細(xì)胞并進(jìn)行評(píng)估
 
  Ⅰ. 懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞的冷凍方法
 
  Ⅱ.CP-1®High Grade保存/解造血干細(xì)胞的方法Ⅲ.CP-1®High Grade應(yīng)用于間質(zhì)細(xì)胞冷保存/解
 
  冷凍保存液的制備
 
  ·1.CP-1高等級(jí),25%HSA,將介質(zhì)冷卻至4℃。
 
  ·2.將CP-1高級(jí)6.8 mL,25%HSA 3.2 mL和10.0 mL培養(yǎng)基加入離心管中,并均勻混合。
 
  ·3.即將使用之前,請(qǐng)保存在4℃下。
 
  細(xì)胞冷凍保存
 
  ·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細(xì)胞,并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)。
 
  ·2.離心除去上清液。
 
  ·3.預(yù)先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25%HSA /培養(yǎng)基(冷凍保存液-2的制備),
 
  均勻懸浮至1×106細(xì)胞/ mL。
 
  ·4.將各1 mL放入冷凍管中,放入冷凍容器中,并在-80°C緩慢冷凍。
 
  ·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。
 
  解凍細(xì)胞
 
  ·1.事先在離心管中準(zhǔn)備9 mL培養(yǎng)基。
 
  ·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管,并在37°C的溫水浴中快速融化。
 
  ·3.將所有解凍的細(xì)胞添加到培養(yǎng)基中并離心。
 
  ·4.除去上清液,并添加適量的培養(yǎng)基。
 
  ·5.在每種使用的細(xì)胞類型的最佳條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
 
  Ⅳ.評(píng)價(jià)結(jié)果(質(zhì)細(xì)胞冷保存
 
  [目的]關(guān)于有望在將來(lái)用于再生醫(yī)學(xué)的人間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)可以冷凍保存在CP-1高等級(jí)中,并可以通過(guò)廉價(jià),方便的干冰穩(wěn)定地長(zhǎng)期運(yùn)輸嗎?
 
  [方法]將人脂肪來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC-AT)或人骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC-BM)冷凍在CP-1High Grade或?qū)φ罩?下圖中的A)(1 x 106細(xì)胞)  / mL),并儲(chǔ)存在液氮罐中。 儲(chǔ)存在液氮罐中后,應(yīng)在假定干冰運(yùn)輸(-80°C·7天,-60°C·3天,60°C·7天),融化后立即存活率和第二天培養(yǎng)的每種條件下儲(chǔ)存 確認(rèn)對(duì)血管的粘附率(粘附率=活細(xì)胞數(shù)/接種的活細(xì)胞數(shù))。
 
  [結(jié)果]在所有條件下,融化后的存活率均為90%以上,未觀察到差異(下圖B)。 然而,在冷凍的hMSC作為對(duì)照中,解凍后的第二天在-60°C儲(chǔ)存時(shí)觀察到許多未粘附在培養(yǎng)箱中的死細(xì)胞,但是在CP-1中冷凍的hMSC中幾乎沒有觀察到死細(xì)胞,并且?guī)缀鯖]有觀察到所有死細(xì)胞。 連接細(xì)胞(下圖中的B和C)。
 
  [結(jié)論]由于干冰本身的溫度約為-80°C,因此我們認(rèn)為在CP-1High Grade中冷凍的hMSC可以使用干冰穩(wěn)定且長(zhǎng)期運(yùn)輸。
 

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